即用型RIPA裂解液(经典强效型)
RIPA裂解液(Radio Immunoprecipitation Assay Lysis Buffer)是一款基于表面活性剂原理的经典、强效细胞与组织快速裂解试剂。它利用多种去垢剂的协同作用破坏细胞膜与核膜,能够高效地从动物细胞或组织中提取可溶性总蛋白,同时有效抑制蛋白降解,维持蛋白天然构象与活性。本品为即用型1×液体试剂,无需自行配制,开瓶即用,裂解产物可直接用于常规的Western Blot(WB)、免疫沉淀(IP)、免疫共沉淀(Co-IP) 等下游分析实验。
核心组分与技术原理
本品采用优化的复合去垢剂配方,各组分协同作用,实现高效、温和的细胞裂解与蛋白提取:
离子型去垢剂(如SDS、脱氧胆酸钠) :强效破坏细胞膜与核膜结构,有效释放胞内及核内蛋白,同时对蛋白质具有较强的溶解能力。
非离子型去垢剂(如Triton X-100、NP-40) :温和裂解细胞膜,在保证充分裂解的同时,有助于保持蛋白质的天然构象与活性,尤其适用于免疫沉淀等需要保留蛋白相互作用的实验。
缓冲盐体系(Tris-HCl、NaCl) :维持裂解体系稳定的pH环境与适宜的离子强度,为蛋白提供温和的保存环境。
蛋白酶与磷酸酶抑制剂(需用户另行添加) :本品通常不含蛋白酶和磷酸酶抑制剂,使用前需根据实验需求添加PMSF、蛋白酶抑制剂混合物(cocktail)及磷酸酶抑制剂,以防止蛋白降解和去磷酸化。
基于上述组分的协同作用,本品可在冰上或4℃条件下,于10-30分钟内完成细胞或组织的充分裂解,释放的总蛋白保持天然构象,适用于多种下游分析。
核心优势
1. 高效裂解,全面提取蛋白
复合去垢剂配方能快速破坏细胞膜及核膜,有效释放胞质蛋白、膜蛋白和核蛋白等多种组分,蛋白提取效率高、产量足,适用于多种生物样本(贴壁细胞、悬浮细胞、动物组织等)。
2. 配方温和,保护蛋白活性
在保证充分裂解的同时,本品配方经过优化,有助于保持蛋白质的天然构象和活性。根据裂解强度不同,可提供强、中、弱三类产品,以适应不同的实验需求。本品为经典强效型,适合大多数常规蛋白提取场景。
3. 即开即用,操作便捷
本品为即用型1×液体试剂,无需自行称量各组分、调节pH与过滤除菌。开瓶即用,有效避免人工配制过程中的配比偏差与污染风险,大幅节省实验准备时间。
4. 应用广泛,兼容性强
裂解产物兼容多种下游分析技术,包括SDS-PAGE、Western Blot、免疫沉淀(IP)、免疫共沉淀(Co-IP)、ELISA以及蛋白定量(BCA法) 等。
5. 结果稳定,可重复性好
产品经过严格的质量控制和批次稳定性验证,每批次产品性能高度一致,能有效确保实验结果的稳定性和可重复性。
核心应用场景
本品广泛适用于蛋白功能研究中的各类实验场景:
1. 蛋白质电泳与免疫印迹(核心应用)制备用于SDS-PAGE分析和Western Blot实验的高质量蛋白样品,是RIPA裂解液最经典的应用。
2. 免疫沉淀与免疫共沉淀(核心应用)裂解产物可用于抗原-抗体复合物的特异性富集及蛋白质间相互作用研究。温和的配方有助于维持蛋白复合物的天然构象。
3. 蛋白定量裂解产物适用于BCA法蛋白定量,为后续实验提供准确的蛋白浓度数据。
4. 其他应用本品也兼容报告基因检测、酶活性测定、蛋白纯化等实验。
使用说明
准备:将RIPA裂解液从储存条件取出,置于冰上融化。根据实验需求,在使用前即刻加入蛋白酶抑制剂(如PMSF) 和/或磷酸酶抑制剂。重要提示:PMSF在水溶液中不稳定,需在裂解前数分钟内加入。
裂解:将含抑制剂的裂解液加入处理好的细胞或组织样本中,在冰上或4℃环境下进行裂解(通常10-30分钟),期间可偶尔涡旋振荡或吹打以促进裂解。
收集:裂解完成后,在4℃下离心(通常12,000-14,000 rpm,10-15分钟),收集上清液即为所需的总蛋白样品。
定量:使用BCA蛋白浓度测定试剂盒测定蛋白浓度(注意:本品含较高浓度去垢剂,不适用Bradford法)。
后续实验:将蛋白样品进行SDS-PAGE电泳、Western Blot或免疫沉淀等下游分析。
注意事项
抑制剂添加:多数即用型RIPA裂解液本身不含蛋白酶和磷酸酶抑制剂。为防止蛋白降解和去磷酸化,使用前必须根据实验需求添加相应的抑制剂。
低温操作:所有裂解步骤应在冰上或4℃环境下进行,以维持蛋白稳定性。
浓度测定:由于裂解液中含有较高浓度的去垢剂(如Triton X-100、SDS),不能使用常规的Bradford法测定蛋白浓度,应使用BCA法或去垢剂兼容型的蛋白定量试剂盒。
沉淀处理:裂解液中含有SDS,低温下可能析出沉淀。使用前请仔细观察,若有沉淀,可于37℃水浴加热溶解,恢复至室温后使用。
分装保存:为避免反复冻融影响产品性能,建议收到产品后分装冻存于-20℃。
品质保障
本品依托成熟的标准化生产工艺与严格的质量控制体系,每批次产品经过严格质检,确保批次间性能高度一致。产品经0.22 μm滤膜过滤处理,无菌无污染。仅限专业人员的科学研究使用,不得用于临床诊断或治疗。为了您的安全和健康,请穿实验服并佩戴一次性手套操作。
RIPA裂解液以其高效的裂解能力、温和的蛋白保护性能、即开即用的便捷设计以及广泛的实验兼容性,成为蛋白功能研究中获取高质量蛋白样品的可靠工具,是Western Blot、免疫沉淀等实验的理想选择。
厂家联系微信号(同手机号):19850855600

厂家联系微信号(同手机号):19850855600或扫二维码添加微信,可免费领取试用装(包邮):



