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快速封闭液
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产品详情/ INTRODUCTION

快速封闭液(即用型,无蛋白)

快速封闭液是一款专为Western Blot、ELISA及免疫组化(IHC)等免疫学实验设计的即用型高效封闭试剂。它采用优化的无蛋白配方,能够在5-15分钟内快速阻断NC或PVDF膜上的非特异性结合位点,有效降低背景信号,显著提升目标蛋白检测的信噪比与特异性


一、产品核心优势

快速高效,大幅缩短实验时间

传统封闭液(如脱脂奶粉、BSA)通常需要室温封闭1小时或4℃封闭过夜,严重拖慢实验进度。本品封闭时间通常仅需5-15分钟,封闭效果可等同或优于传统封闭液

即用型设计,操作便捷

本品为即用型液体试剂,无需称量、溶解或稀释。开瓶即可直接使用,省去繁琐的配制步骤,有效避免人工配制过程中的污染风险与批次差异

无蛋白配方,低背景、高信噪比

本品采用无蛋白配方,有效避免了抗体与封闭剂的非特异性结合。它不与蛋白产生非特异性结合,只封闭转印膜而不会屏蔽样品蛋白的抗体识别位点,从而显著提高抗体检测灵敏度。与传统的脱脂奶粉和BSA封闭相比,能够获得更低的背景、更高的信噪比

兼容性广泛,适配多种检测体系

本品不含内源性磷酸化蛋白及生物素,对磷酸化特异性抗体生物素-亲和素检测系统均不会产生干扰。其兼容辣根过氧化物酶(HRP)、碱性磷酸酶(AP)和生物素标记的二抗。主要适用于Western Blot(WB)、ELISA、免疫组化(IHC)及免疫荧光(IF) 等实验

节省抗体,经济高效

使用本品封闭后,所需的最适抗体浓度通常低于常规使用浓度,可有效节省珍贵抗体用量。


二、技术原理

在Western Blot等免疫学实验中,转印结束后,转印膜上存在大量未被蛋白占据的空白区域,这些区域会非特异性吸附后续孵育的一抗和二抗,导致背景信号升高。封闭的核心目的正是阻断这些非特异性结合位点。

传统封闭液(如脱脂奶粉、BSA)利用蛋白成分以吸附方式结合于膜表面的空白间隙。但这类方法存在局限:脱脂奶粉可能含有生物素和碱性磷酸酶,干扰基于生物素-亲和素的检测系统;BSA在提纯过程中可能残留IgG或其他血清蛋白,与哺乳动物抗体产生交叉反应;且封闭耗时长(通常需1-2小时)。

本品采用无蛋白配方,为多种聚合物的混合液,只结合封闭转印膜而不结合蛋白,因此不会屏蔽样品蛋白的抗体识别位点。同时,无蛋白配方有效避免了抗体与封闭剂的非特异性结合,最大程度地降低了背景。实验结果背景低、信号强,信噪比更高。


三、核心应用场景

本品广泛适用于以下免疫学实验:

  • Western Blot(免疫印迹) :转膜后的膜封闭(最核心应用)

  • ELISA(酶联免疫吸附测定) :微孔板的封闭

  • 免疫组化(IHC)免疫荧光(IF) :组织切片或细胞爬片的封闭

  • 一抗或二抗的稀释:可作为抗体稀释液使用


四、使用说明

以Western Blot实验为例,标准操作流程如下:

  1. 完成转膜:将蛋白转印至PVDF膜或NC膜上。

  2. (可选)洗涤:可用TBST或PBST缓冲液漂洗膜1-2分钟。

  3. 加入封闭液:根据膜的大小,在平皿或孵育盒中加入足量本品,确保完全浸没膜。

  4. 室温孵育:置于水平摇床上,室温振荡孵育5-15分钟(通常10分钟即可)

  5. 后续实验:封闭完成后,即可直接进行一抗孵育等后续操作。

注意:对于背景极高的抗体,可将封闭时间延长至30-60分钟,或于4℃封闭过夜。


五、储存条件

项目建议
产品形式即用型(1×)液体
储存条件2-8℃保存;长期不用可-20℃保存
有效期12个月
仅限科研使用仅供实验室研究与分析测试使用

快速封闭液以无蛋白配方、5-15分钟快速封闭、低背景高信噪比以及广泛的实验兼容性,将传统免疫检测实验中耗时1小时以上的封闭步骤缩短至数分钟,是提升Western Blot、ELISA及免疫组化等实验效率与数据可靠性的理想选择。

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