柠檬酸-柠檬酸钠缓冲液是实验室酸性至弱酸性条件下应用最广的缓冲体系之一,有效pH范围为3.0至6.6。该缓冲液由柠檬酸(弱酸)与柠檬酸钠(共轭碱)按不同比例混合而成,其缓冲原理基于柠檬酸根离子的质子化与去质子化平衡,能够在添加少量酸或碱时维持pH相对稳定。
核心应用场景
免疫组化抗原修复是该缓冲液最核心的应用。福尔马林固定过程中,亚甲基交联键的形成会屏蔽抗原表位。柠檬酸-柠檬酸钠缓冲液(常用pH 6.0)通过微波或水浴加热处理,可有效断裂交联键,充分暴露抗原位点,显著改善免疫染色效果。临床免疫组化操作中,0.01mol/L柠檬酸钠缓冲液(pH 6.0)是抗原热修复的标准试剂。不同修复方式——高压修复、微波修复、沸水浴修复——均可使用该缓冲液,具体pH需根据抗体说明书调整。
RNA提取中,柠檬酸盐的螯合特性和低pH环境(通常pH 3.0-5.0)有助于抑制RNase活性和碱水解反应,保护RNA完整性。此外,该缓冲液还广泛用于ELISA、酶活性测定等生化反应体系(pH根据具体酶的最适pH确定3.0-6.6)。
产品规格与配制方法
市售产品常见浓度规格为0.05M、0.1M、0.5M和1M,pH可覆盖3.0至6.6的系列规格(步长0.2)。配制方法为以0.1M柠檬酸一水溶液和0.1M柠檬酸三钠二水溶液为母液,按不同体积比例混合。例如,配制pH 5.0的缓冲液需混合35.0mL 0.1M柠檬酸和65.0mL 0.1M柠檬酸钠。保存条件为2~8℃冷藏,有效期为3个月。
杭州富沃克生物科技有限公司提供多种规格的柠檬酸-柠檬酸钠缓冲液产品,覆盖不同浓度与pH规格,采用高纯原料配制,适用于免疫组化抗原修复、RNA提取等实验场景,即开即用,省去自行配制的繁琐步骤。
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