3M乙酸钠溶液(pH 5.2):核酸沉淀与纯化的核心分子生物学试剂
乙酸钠(Sodium Acetate,亦称醋酸钠,NaAc)是分子生物学与生物化学实验室中应用最为广泛的基础试剂之一。3M乙酸钠溶液(pH 5.2) 作为高浓度即用型储备液,凭借其精准的弱酸性pH环境与高浓度钠离子(Na⁺)供给能力,已成为核酸乙醇沉淀、RNA提取纯化、DNA浓缩与脱盐等关键实验流程中不可或缺的核心试剂。
产品核心信息
本品为3 mol/L (3M) 高浓度乙酸钠水溶液,pH已精确调节至5.2。溶液经0.22 μm膜过滤及高压灭菌处理,确保无菌、无DNase、无RNase、无蛋白酶。DEPC处理进一步确保无RNase污染,可直接用于RNA提取等对核酸酶高度敏感的分子生物学实验。在正确储存条件下(室温保存,有效期为12个月),可保持良好的稳定性。
技术原理
核酸乙醇沉淀的核心机制
乙酸钠在核酸乙醇沉淀中发挥着不可替代的核心作用。其原理基于高浓度单价阳离子(Na⁺)存在下,乙醇可使核酸从溶液中有效沉淀。具体机制包括三个方面:
电荷中和:核酸分子带负电荷的磷酸基团之间存在静电排斥力。乙酸钠解离出的高浓度Na⁺能够中和这些负电荷,减少分子间的静电排斥。
离子氛围提供:高浓度的Na⁺在核酸分子周围形成离子氛围,降低核酸与水分子之间的相互作用。
协同脱水:乙醇夺取核酸周围的水分子,使核酸失水。同时乙醇消除DNA的水化层,使带负电荷的磷酸基团暴露出来与Na⁺结合,最终形成核酸钠盐沉淀。
pH 5.2的精准调控
pH 5.2的弱酸性环境是核酸乙醇沉淀的理想条件。在此pH下,核酸分子的磷酸基团保持适当的质子化状态,有利于Na⁺的有效结合与核酸的团聚沉淀。在低温环境下(-20℃),这一促沉淀效应会被进一步强化。
产品核心优势
预调pH 5.2,即开即用免校准
本品pH已精确调节至5.2,无需自行配制与校准,开瓶即可直接使用。有效避免人工配制过程中的pH偏差与浓度误差,大幅节省实验准备时间。
3M高浓度储备液,按需稀释灵活使用
作为3M高浓度储备液,使用时按1/10体积加入核酸溶液(终浓度约0.3M),再加入2-2.5倍体积的无水乙醇即可。这一标准化操作流程广泛适用于质粒DNA提取、PCR产物纯化、RNA提取后的回收、DNA的浓缩与清洁等实验。
无菌无酶处理,保障实验精准
本品经0.22 μm膜过滤及高压灭菌处理,确保无菌、无DNase、无RNase、无蛋白酶污染。经DEPC处理进一步确保无RNase残留,可直接用于RNA提取等对核酸酶高度敏感的分子生物学实验。
乙酸根残留对下游实验影响小
本品经乙醇沉淀后,残留的乙酸根对下游PCR、酶切等实验影响小。乙酸钠浓度大于5mM时才会抑制PCR反应,而标准乙醇沉淀操作后核酸沉淀中的乙酸钠残留量远低于这一阈值,确保了后续分子生物学实验的顺利进行。
应用广泛,覆盖核酸与蛋白研究
本品广泛应用于DNA和RNA的纯化与沉淀、蛋白质结晶、蛋白电泳中凝胶的染色以及HPLC等领域。
核心应用场景
一、RNA提取与纯化(核心应用)
本品是RNA乙醇沉淀的标准试剂。在RNA提取流程中,加入1/10体积的3M乙酸钠(pH 5.2) 和2.5倍体积的无水乙醇,可高效沉淀RNA。本品经DEPC处理及高压灭菌,确保无RNase污染,可直接用于RNA相关实验。研究表明,使用1/10体积的3M乙酸钠(pH 5.2)进行乙醇沉淀后,超过90%的RNA转录本可被回收。适用于低浓度RNA(5ng/ml) 的回收。
二、DNA乙醇沉淀与纯化(核心应用)
在DNA乙醇沉淀中,加入1/10体积的3M乙酸钠(pH 5.2) 和2-2.5倍体积的无水乙醇,混合后置于-20℃即可使DNA沉淀。广泛适用于:
质粒DNA提取中的DNA浓缩与脱盐
PCR产物纯化与回收
基因组DNA的浓缩与清洁
低浓度DNA(5ng/ml)的回收
三、低浓度核酸的乙醇沉淀(核心应用)
本品可作为乙醇沉淀的共沉剂,对于低浓度核酸(5ng/ml) 的乙醇沉淀特别有效。使用本品进行乙醇沉淀时,不需要将DNA溶液置于低温,便可直接离心回收。
四、蛋白质结晶与电泳
本品可用于蛋白质结晶以及蛋白质凝胶电泳中凝胶染料的制备。
五、高效液相色谱(HPLC)
醋酸钠缓冲液是高效液相色谱(HPLC) 分析中常用的流动相组分。
使用与储存建议
标准操作流程:
在DNA或RNA水溶液中,加入1/10体积的3M乙酸钠(pH 5.2)
加入2-2.5倍体积的无水乙醇
混匀后置于-20℃(15分钟至过夜均可)
高速离心(12,000-14,000 rpm,10-15分钟)
弃上清,用70%乙醇洗涤沉淀一次
干燥后溶解于适量DEPC处理水或TE缓冲液中
保存条件:建议室温密封保存,有效期为12个月。开封后请尽快使用,以防污染影响实验结果。
注意事项:
本产品仅限于专业人员的科学研究使用,不得用于临床诊断或治疗。
操作时请穿实验服并戴一次性手套。
沉淀RNA时应使用无RNase处理的溶液。
乙酸钠浓度大于5mM时会抑制PCR反应,标准乙醇沉淀后残留量远低于此阈值,但后续实验仍需注意。
3M乙酸钠溶液(pH 5.2)以精准的pH调控、高浓度的钠离子供给、无菌无酶的卓越品质以及即开即用的便捷设计,为RNA提取、DNA沉淀与纯化、低浓度核酸回收等核心分子生物学实验提供了可靠、高效的试剂保障。选择本产品,即意味着从核酸沉淀的起点获得稳定、可控的品质支撑,让每一个实验数据都经得起验证与重复。
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