酵母菌基因组提取纯化试剂盒(磁珠法)
在酵母遗传学、分子生物学及合成生物学研究中,高质量基因组DNA的获取是开展PCR鉴定、基因克隆、Southern杂交、全基因组测序及表观遗传学分析等下游实验的前提条件。然而,酵母菌拥有一层坚韧的多糖-蛋白质复合细胞壁,其结构复杂、难以破碎,传统提取方法往往需要冗长的酶解破壁或繁琐的液氮研磨,不仅耗时耗力,还容易导致DNA剪切降解和交叉污染。
酵母菌基因组提取纯化试剂盒(磁珠法) 正是针对这一核心难题而研发的专项解决方案。它整合了高效破壁、磁珠特异性富集与杂质高效去除三大核心功能,依托超顺磁性纳米磁珠对核酸的高亲和力与特异性富集能力,实现酵母基因组DNA的快速释放与高纯度纯化。操作全程无需酚、氯仿等有毒有机溶剂,也无需耗时的醇类沉淀步骤,为PCR扩增、基因克隆、测序等下游分子实验提供高纯度、高完整性的优质模板。
核心技术原理
本试剂盒的纯化原理基于高效破壁、磁珠特异性吸附、杂质高效去除三个核心步骤的协同作用:
1. 高效破壁——针对酵母细胞壁的优化裂解
酵母细胞壁的坚韧结构是核酸提取的主要障碍。本试剂盒采用化学裂解与酶法破壁相结合的策略。试剂盒通常配备溶壁酶(Lyticase),在适宜温度下孵育可温和而有效地去除酵母细胞壁。部分试剂盒同时配备特异性研磨珠(如锆珠),在破壁仪的高速振荡下对细胞进行物理撞击,进一步强化破壁效果。随后在蛋白酶K和胍盐裂解液的作用下进一步裂解细胞、释放基因组DNA,同时有效灭活内源性核酸酶,防止DNA在提取过程中被降解。这一裂解体系广泛适用于酿酒酵母、毕赤酵母、裂殖酵母等多种酵母菌株。
2. 磁珠特异性吸附——高纯度核酸富集
在细胞裂解后,释放出的基因组DNA在特定高盐缓冲液条件下,通过氢键和静电作用被特异性吸附到超顺磁性纳米磁珠表面。磁珠表面经特殊化学修饰,对核酸具有超高亲和力与特异性,而对蛋白质、多糖及其他细胞代谢物等杂质几乎不吸附。借助外界磁场(如磁分离架),结合了DNA的磁珠可在数秒内与溶液中的其他成分快速分离。
3. 高效去杂——彻底去除PCR抑制物
磁分离后,经过多次洗涤步骤去除残留的蛋白质、多糖、盐离子等杂质。最后使用低盐洗脱缓冲液将纯净的基因组DNA从磁珠上洗脱下来,即可获得可直接用于下游实验的高质量DNA。
产品核心优势
高效破壁,得率高
利用特异性研磨珠与优化裂解液协同作用,无需溶菌酶长时间孵育,可短时间内即可获得高质量的DNA,手工操作时间极少。样品裂解后纯化流程仅需约15分钟即可完成。
高纯度、高完整性
通过本试剂盒纯化得到的基因组DNA纯度好、得率高。高效去除蛋白质、多糖等PCR抑制物,所得DNA产物OD₂₆₀/₂₈₀比值在1.6至1.9之间。DNA片段长度可达50kb左右,平均为30kb左右。最短为100bp的DNA片段也可被有效纯化。
操作安全,绿色环保
提取全过程无需使用酚、氯仿、β-巯基乙醇等有毒有机溶剂。操作过程安全,对实验人员健康友好,也大幅降低了废液处理成本。
适配灵活,兼容手动与自动化
本试剂盒既支持手工磁力架操作,也可完美适配磁珠法全自动核酸提取仪,支持高通量批量提取。纯化得到的DNA可直接用于酶切、PCR、测序和标记等相关实验。
样本兼容性广
适用于从酵母培养物(0.5~1.5ml培养液)、多种来源的酵母中提取基因组DNA。部分试剂盒还可兼容细菌、真菌等微生物样本。
核心应用场景
本试剂盒提取的高质量酵母基因组DNA可广泛应用于以下实验场景:
PCR与qPCR:用于酵母特异性基因扩增、转化子鉴定及种属鉴定
基因克隆与载体构建:为目的基因的扩增与克隆提供高保真模板
基因测序:适用于一代测序及二代测序(NGS)文库构建
酶切分析与Southern杂交:验证基因结构与基因组特征
文库构建:为基因组文库的构建提供高质量起始材料
芯片检测:用于基因表达谱及SNP分型分析
产品规格与保存
裂解液LA:细胞裂解缓冲液
结合液LB:提供高盐环境,促进DNA与磁珠结合
洗涤液:去除蛋白质、多糖、盐离子等杂质
洗脱液EB:低盐缓冲液,用于洗脱纯净DNA
MagExtract Suspension:超顺磁性纳米磁珠悬液
蛋白酶K:裂解细胞、消化蛋白、灭活核酸酶
RNase Solution:去除RNA污染
Zirconium Beads Tube:研磨珠管,用于高效破壁
保存方法:不同组分的储存条件有所差异。PartⅠ(裂解液等)建议2-8℃保存;PartⅡ(磁珠等)建议室温避光保存。有效期为18个月。
操作要点:
酵母菌基因组提取纯化试剂盒(磁珠法)以针对酵母细胞壁的优化破壁技术、磁珠特异性富集的高纯度保障、手动与自动化双模式灵活适配三大核心优势,为酵母分子生物学研究提供了高效、可靠、安全的核酸制备解决方案。选择本试剂盒,即意味着从样本处理的第一步起,就为PCR、测序等下游实验奠定了坚实可靠的基础。
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