Solution I – 质粒提取重悬液(1 L 规格)
■ 核心功能
碱裂解法质粒提取中的第一步——菌体重悬,用于将过夜培养的离心菌沉淀重新悬浮。
■ 组分清单(1 L 体系)
| 原料 | 加入量 | 终浓度 | CAS |
|---|---|---|---|
| 1 M Tris-HCl (pH 8.0) | 25 mL | 25 mM | 1185-53-1 |
| 0.5 M EDTA (pH 8.0) | 20 mL | 10 mM | 60-00-4 |
| 20% Glucose | 45 mL | 50 mM | 93780-23-5 |
| dH₂O | 补齐至 1 L | —— | —— |
■ 制备流程
① 按上表量取各组分,混合于1 L容器中;
② 充分搅拌均匀后,进行高压蒸汽灭菌(121 ℃,20 min);
③ 灭菌完毕,冷却至室温,于 4 ℃ 避光保存;
④ 启用前,按每 50 mL 溶液补加 2 mL RNase A(20 mg/mL),混匀即用。
■ 使用禁忌与注意事项
必须确保灭菌彻底(溶液接触活菌,防止污染)。
重悬标准:菌沉淀必须完全分散,无肉眼可见的絮状团块,否则裂解效率下降。
建议重悬后立即进行后续裂解步骤,避免放置过久导致细胞恢复活性。

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