PBR322 DNA（4361 bp）限制酶切位点图谱与应用指南

概述

pBR322 是分子生物学中最经典的质粒载体之一，总长 4361 bp，含氨苄青霉素（Amp）和四环素（Tet）双抗性标记，广泛应用于基因克隆、表达载体构建和限制酶切分析。准确理解其限制酶切位点图谱，是进行载体线性化、片段分析和克隆策略设计的基础。

💡 pBR322 的核心优势：双抗性筛选标记（Ampᴿ + Tetᴿ）、多克隆位点（MCS）位于 Tet 抗性基因区域（插入失活筛选）、复制起点（ori）来自 pMB1（高拷贝数，约 15～20 copies/cell）。

图谱坐标系统

参考文献：

1.Sutcliffe. J. G. (1979) Cold Sping Harbor Symposium 43, 77-90.

2.Peden. K. W.C. (1983) Gene 22, 277-280.

3.Watson, N. (1988) Gene 70, 399-403.

A：切位数B：限制酶C：酶切位点的第一个碱基的位置D：切下片段的碱基（从小排列）绿字表示 FWKNE销售的限制酶。