pUC19 DNA（2686 bp）限制酶切位点图谱与应用指南

概述

pUC19 是分子生物学中最经典的克隆载体之一，总长 2686 bp。由 pBR322 改造而来，保留了 Ampᴿ（氨苄青霉素抗性） 筛选标记和高拷贝数复制起点（pMB1 ori，因缺失 rop 基因，拷贝数达 500–700 copies/cell）。

💡 pUC19 与 pUC18 的区别：两者结构基本相同，仅 MCS 排列方向相反。pUC19 的 MCS 序列为 5‘→3’ 方向（如 EcoRI → HindIII），pUC18 则为反向。

pUC19 的核心优势：

• 高拷贝数（500–700 copies/cell）

• 氨苄青霉素抗性（Ampᴿ）筛选

• lacZα 蓝白斑筛选系统

• 54 bp MCS 含 13 个独特限制酶切位点

• 小体积（2686 bp），便于操作和转化

图谱坐标系统

参考文献:

1. Yanisch-Perron,C.,Vieira,J.andMessing,J.(1985)Gene33,103-119.

A：切断数B：限制酶C：酶切位点的第一个碱基的位置D：切下片段的碱基数（从

小排列）绿字表示FWKNE销售的限制酶。