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2%过氧化氢酶溶液(w/v)配制与使用指南
发布时间:2026-07-25 点击数:1

一、核心参数一览

参数内容
英文名称Catalase Solution, 2% (w/v)
CAS号9001-05-2
来源牛肝(常见)、微生物发酵
催化反应2H₂O₂ → 2H₂O + O₂↑
最适pH7.0(稳定范围:6.0~8.0)
转换数(kcat)~10⁶ s⁻¹(牛肝过氧化氢酶)
浓度定义2 g酶粉 / 100 mL溶液(w/v)

二、配制前的关键决策

缓冲液怎么选?

缓冲液适用性注意事项
50 mmol/L磷酸缓冲液(pH 7.0)首选,适用于绝大多数实验磷酸根对酶蛋白有保护作用,不干扰多数检测体系
PBS(pH 7.0)细胞/组织实验首选含盐体系,需确认是否干扰下游检测
Tris-HCl(pH 7.0)部分生化实验可用⚠️ 温度变化会引起pH偏移(4℃时约上升0.3~0.5单位)
纯水不推荐缺乏离子保护,酶蛋白易聚集析出
建议:若您的实验体系必须使用特殊缓冲液(如含去垢剂、金属离子等),建议先用该缓冲液做小试(验证活性回收率),确认可行后再批量配制。

三、标准配制方法(100 mL为例)

3.1 配方

组分用量说明
过氧化氢酶粉末2 g确认比活性,记录批号
50 mmol/L磷酸缓冲液(pH 7.0)定容至100 mL4℃预冷
超纯水用于配制缓冲液,电阻率≥18.2 MΩ·cm

3.2 操作步骤

步骤操作关键要点
1配制50 mmol/L磷酸缓冲液,调pH至7.0,4℃预冷使用校准过的pH计,温度补偿功能开启
2取5~10 mL预冷缓冲液于小烧杯中,置于冰上保持低温是活性保留的第一道防线
3加入2 g酶粉,用玻璃棒轻轻搅拌至糊状严禁磁力搅拌器(>500 rpm剪切力导致变性) ;搅拌至无可见干粉(约2~3分钟)
4确认无干粉后,逐步加入剩余缓冲液少量多次,避免局部浓度过高
5转移至容量瓶,定容至100 mL,颠倒混匀避免剧烈振荡起泡
6按单次实验用量分装至EP管,4℃冷藏严禁冷冻

3.3 关键操作原理说明

操作要求科学原理
全程4℃操作酶蛋白在室温下分子热运动加剧,疏水基团暴露导致聚集失活
先调糊状再稀释干粉直接加入大量缓冲液易形成“干粉团块”,内部无法水化,造成局部浓度不均
禁用磁力搅拌器磁力搅拌子的高速旋转(>500 rpm)产生剪切力,足以使球状蛋白三级结构破坏
严禁冷冻冰晶形成破坏酶蛋白空间结构,冻融一次活性损失可达50%~70%

参照依据:Sigma-Aldrich牛肝过氧化氢酶产品说明书及相关酶学方法文献[5]

商业化即用型产品的价值

2%过氧化氢酶溶液实拍.png

杭州富沃克生物科技有限公司的产品,含稳定剂配方,经过滤除菌和惰性气体保护,4℃保存24个月不失活,适用于酶动力学研究、抗氧化机制研究、H₂O₂残留清除及生化教学等场景,开瓶即用,省去自配的繁琐与活性波动风险[3][6]。

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官网链接:高抗扰型过氧化氢酶溶液耐受复杂组分环境,活性稳定不易失活,适配各类粗提体系与成分复杂的生物实验反应体系-富沃克生物科技(深圳)有限公司

参考文献

[1] 过氧化氢酶活性测定(高锰酸钾滴定法)[EB/OL]. 生物谷(BioMart), 2025. —— 用于紫外分光光度法测活与酶活力单位定义参考。

[2] 过氧化氢酶溶液(C9H10O3)=2%(wt)[EB/OL]. ChemicalBook, 2026. —— 用于浓度定义(wt)的对照参考。

[3] 2%过氧化氢酶实验试剂产品说明[EB/OL]. 富沃克生物科技(深圳)有限公司, 2026. —— 用于商品化溶液工艺与保存期数据。

[4] 2%过氧化氢酶溶液产品说明[EB/OL]. 杭州富沃克生物科技有限公司, 2026. —— 用于操作细节与保存条件。

[5] 过氧化氢酶 来源于牛肝脏 aqueous solution 产品说明书[EB/OL]. Sigma-Aldrich. —— 用于酶蛋白稳定性、冻融数据及比活性参考。

[6] 过氧化氢酶溶液 2% 科研用产品说明[EB/OL]. 杭州富沃克生物科技有限公司, 2026. —— 用于商业化产品稳定化工艺。


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