一、核心参数一览
| 参数 | 内容 |
|---|---|
| 全称 | Tris-硼酸-EDTA缓冲液（Tris-borate-EDTA） |
| 浓度定义 | 10×浓缩液，使用时稀释至1×或0.5× |
| 1×工作液组成 | 89 mM Tris、89 mM硼酸、2 mM EDTA |
| 1×工作液pH | 8.2–8.4（典型值8.3） |
| 保存条件 | 室温保存（切勿冷藏） |
二、TBE vs TAE——怎么选？
| 对比项 | TBE | TAE |
|---|---|---|
| 缓冲能力 | 强，适合长时间电泳 | 较弱，不宜过夜电泳 |
| 最佳分离片段 | <1 kb，条带更锐利 | >15 kb大片段分离更佳 |
| DNA回收/酶切 | 硼酸抑制回收和酶反应 | 兼容性好 |
| 适用场景 | PAGE胶、小片段DNA分析、测序胶 | 常规琼脂糖凝胶、回收电泳 |
三、标准配方（经典配方，多方验证）
综合GoldBio、Kerr Lab（德克萨斯大学奥斯汀分校）、protocols.io（剑桥大学）等多份来源，10× TBE的经典配方如下：
| 组分 | 用量（配制1 L 10×） | 1×工作液终浓度 |
|---|---|---|
| Tris碱 | 108 g | 89 mM |
| 硼酸 | 55 g | 89 mM |
| 0.5 M EDTA（pH 8.0） | 40 mL | 2 mM |
关于EDTA：如果用固体Na₂EDTA·2H₂O代替EDTA母液，需称取7.44 g。建议直接使用预配好的0.5 M EDTA母液（pH 8.0）。
⚠️ 不同厂家配方差异提示：本配方为经典配方（GoldBio/Kerr Lab）。不同厂家对10× TBE的配方定义不完全一致——例如Sigma-Aldrich的10× TBE为1.3 M Tris、450 mM硼酸、25 mM EDTA。更换试剂品牌时请以产品说明书为准。
四、配制步骤
五、三个关键问题
Q1：10× TBE需要调pH吗？
不需要。 10× TBE配好后不需要调pH——1×工作液的pH自然在8.2–8.4之间（典型值8.3）。多家主流供应商（Thermo Fisher、Sigma-Aldrich）的产品说明均明确标注无需调pH。
如果配好后pH明显偏离8.2–8.4，请检查Tris碱和硼酸的纯度及称量是否准确。
Q2：配好的10× TBE为什么会有沉淀？
10× TBE中的硼酸在低温或长期存放时因溶解度下降而析出结晶，这是TBE浓缩液的固有物理特性，并非变质。
处理方式：
预防建议：
Q3：10× TBE能放多久？
| 类型 | 有效期 | 说明 |
|---|---|---|
| 自配溶液 | 建议6个月内使用 | 不含稳定剂 |
| 商品化产品 | 以标签标注为准（通常12–24个月） | 经质控和稳定化处理 |
长期存放后使用前应检查溶液状态——若有大量沉淀且加热后无法完全溶解，建议重新配制。
六、稀释方法
| 工作液浓度 | 配制方法 | 适用场景 |
|---|---|---|
| 1× TBE | 100 mL 10× TBE + 900 mL 去离子水 | PAGE胶电泳、常规TBE电泳 |
| 0.5× TBE | 50 mL 10× TBE + 950 mL 去离子水 | 琼脂糖凝胶电泳，电流较小，可使用5–10 V/cm较高电压加快电泳 |
七、常见问题速查
| 问题 | 原因 | 解决方案 |
|---|---|---|
| 配制后溶液有沉淀 | 硼酸析出（正常现象） | 37–50°C水浴加热复溶即可 |
| 溶液长期存放后沉淀增多 | 温度波动或引入尘粒 | 加热复溶；如无法完全溶解则重新配制 |
| 电泳条带模糊 | ①缓冲液过期 ②电压过高 | ①更换新鲜TBE ②降低电压 |
| 切胶回收效率低 | TBE中硼酸抑制回收 | 改用TAE缓冲液 |
| pH值偏离8.2–8.4 | ①称量不准确 ②试剂纯度不足 | 检查称量；更换试剂重新配制 |
八、商业化即用型产品的价值
产品有试用装免费包邮（部分产品），详询微信/同手机：19850855600
参考文献
[1] GoldBio. 10x TBE Stock Solution Instructions. —— 用于10× TBE经典配方（108 g Tris、55 g 硼酸、40 mL 0.5 M EDTA）及1×工作液组成（89 mM Tris、89 mM硼酸、2 mM EDTA，pH~8.3，无需调pH）。
[2] Kerr Lab. TBE Electrophoresis Buffer. University of Texas at Austin, 2012. —— 用于10× TBE标准配方（108 g Tris碱、55 g 硼酸、40 mL 0.5 M EDTA）。
[3] mowohnadine, Molloy J. Preparing 10x TBE Electrophoresis buffer. protocols.io, 2022. doi:10.17504/protocols.io.j8nlkkok5l5r/v1. —— 用于配制步骤及操作要点。
[4] Sigma-Aldrich. Tris-Borate-EDTA buffer Vetec™, 10 ×. —— 用于1× TBE含89 mM Tris-borate和2 mM EDTA，pH 8.3；TBE不推荐用于制备型凝胶回收核酸。
[5] Sigma-Aldrich. Tris-Borate EDTA Buffer, 10X Concentrate (SRE0062). —— 用于10× TBE含0.89 M Trizma、0.02 M EDTA，以硼酸调pH至8.3；沉淀处理：37°C加热至完全溶解。
[6] Thermo Fisher Scientific. Pierce™ 10X TBE Buffer. —— 用于1× TBE含0.089 M Tris、0.089 M硼酸盐、2 mM EDTA，pH 8.2–8.4。
[7] Thermo Fisher Scientific. TBE running buffer (10X) - FAQs. —— 用于沉淀原因（盐结晶成核）及处理：~50°C加热复溶；0.2 µm滤膜过滤预防沉淀。
[8] 核酸电泳缓冲液产品说明. —— 用于TBE缓冲能力强、<1 kb片段分离效果好、不宜用于回收电泳；0.5×TBE可使用较高电压加快电泳。
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