一、50× TAE是什么？
TAE全称是Tris-乙酸-EDTA缓冲液（Tris-acetate-EDTA）[1] 。之所以先配成50倍的浓缩液，主要是为了储存方便、减少污染——取20 mL 50× TAE原液，加入去离子水或超纯水定容至1 L，混匀后即为1×工作液。请勿使用自来水或PBS稀释。
组分 | 用量（配制1 L 50×） | 1×工作液终浓度 |
Tris碱 | 242 g | 40 mM |
冰乙酸（ glacial acetic acid ） | 57.1 mL | 20 mM（乙酸根） |
Na₂EDTA·2H₂O（二水合EDTA二钠） | 37.2 g | 1 mM |
❗注意：不同文献在EDTA用量上有差异，原因在于EDTA存在多种形态（无水、二水、不同钠盐）。37.2 g Na₂EDTA·2H₂O是使用最广泛的版本。如果使用无水EDTA，则只需要18.6 g；如果使用0.5 M EDTA母液（pH 8.0） ，则加入100 mL。选购原材料时务必看清标签！
二、配制步骤（亲测版）
1. 称量：称取242 g Tris碱和37.2 g Na₂EDTA·2H₂O于1 L烧杯中[2]。
2. 溶解：加入约600 mL去离子水，边搅拌边缓慢分批加入NaOH固体（约需18–22 g，具体以pH实测为准），调节pH至约8.0。
3. 加酸：待EDTA完全溶解至溶液澄清后,缓慢加入57.1 mL冰乙酸（注意通风！），继续搅拌混匀。
4. 定容：待溶液冷却至室温，加去离子水定容至1 L。
5. 保存：室温密封保存即可（建议6个月内使用）。若长期保存后出现沉淀，使用前37°C水浴加热并摇匀，不影响效果。如需长期无菌保存，可0.22 μm滤膜过滤后储存。
小贴士：EDTA在近中性pH下溶解极慢。建议先配0.5 M EDTA母液（pH 8.0） ——在EDTA悬浊液中加入NaOH搅拌至澄清，再用这个母液来配TAE，省时省力
三、几个容易被忽略的“避坑”要点
1. TAE不适合长时间电泳
TAE的缓冲能力比TBE小，长时间电泳（比 如超过4小时甚至过夜）会导致缓冲能力耗尽，条带可能跑偏或模糊。如果实验需要长时间跑，建议选用TBE或配备缓冲液循环装置。
2. 回收DNA片段首选TAE
TBE中含硼酸，会与琼脂糖形成复合物，降低DNA回收效率。所以但凡要做切胶回收的样本，首选TAE而不是TBE。这也是TAE在分子生物学实验室中“出镜率”最高的原因之一。
3. 大片段DNA用TAE效果更好
在脉冲场凝胶电泳（PFGE） 中，对于大于13 kb的DNA片段，TAE常被推荐使用，TAE的分离效果优于其他缓冲体系。基因组DNA、大质粒等大片段电泳，TAE是不错的选择。
4. 低温沉淀属正常现象
50× TAE在低温环境下可能会有结晶析出。别慌——37°C水浴加热并摇匀即可，不影响使用效果。
四、TAE vs TBE：一张表帮你选
对比维度 | TAE | TBE |
缓冲能力 | 较弱，不适合长时间电泳 | 较强，适合长时间电泳 |
适用片段 | 基因组DNA或大质粒等大片段DNA，在低电压长时间电泳或脉冲场电泳中，TAE相较于TBE更为常用。 | 小片段DNA（＜1 kb） |
DNA回收 | ✅ 推荐 | ❌ 硼酸影响回收率 |
后续酶反应 | ✅ 影响小 | ❌ 硼酸可能抑制酶活性 |
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产品信息：50× TAE缓冲液（核酸电泳级），可直接用去离子水稀释50倍后使用。
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参考文献
[1] iGEM Thessaly. 50x TAE stock solution. iGEM 2020
[2] Behle A, Pawlowski A. Recipe for 50x TAE buffer. protocols.io, 2018. doi:10.17504/protocols.io.gtvbwn
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