50×TAE缓冲液是核酸电泳实验中两种主流缓冲体系之一,由Tris碱、乙酸和EDTA组成,使用时稀释至1×工作浓度即可。1×TAE工作液含40mM Tris-乙酸和1mM EDTA,pH通常在8.0-8.3之间,且能维持电泳过程中的pH稳定。TAE的优势在于不含硼酸根离子,因此不会与DNA骨架上的羟基形成复合物,对后续的DNA回收效率和酶反应影响较小。若电泳后需要进行凝胶回收、连接转化或限制性酶切鉴定等操作,TAE是更合适的选择。此外,双链线状DNA在TAE中的迁移率较其他缓冲液快约10%,对于大于13kb的大片段DNA分离效果更佳。
TAE的局限性在于缓冲容量相对较低。长时间电泳时,正负极之间的pH漂移可能影响电泳效果,建议定期更换缓冲液。若需进行长时间电泳或分离小于1kb的小片段DNA,可考虑选用TBE缓冲液。在低温环境下TAE可能析出沉淀,此为正常现象,37℃水浴加热溶解后摇匀即可使用。
50×TAE的配制方法为:称取242g Tris碱,量取57.1mL冰乙酸,称取18.6g EDTA·Na₂·2H₂O,加蒸馏水定容至1L。浓溶液室温放置可能有沉淀析出,使用前加热溶解即可。
杭州富沃克生物科技有限公司提供多种规格的50×TAE缓冲液产品,采用高纯Tris碱、冰乙酸和EDTA为原料,经0.22μm过滤除菌,适用于琼脂糖凝胶电泳、DNA片段回收等核酸分析实验场景。
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